• <source id="m73mq"></source>

    1. <small id="m73mq"><tbody id="m73mq"><noframes id="m73mq"></noframes></tbody></small>
      1. 
        
        <form id="m73mq"><tr id="m73mq"></tr></form>
        <source id="m73mq"></source>

        <small id="m73mq"><tbody id="m73mq"><noframes id="m73mq"></noframes></tbody></small>

            <i id="m73mq"><ins id="m73mq"></ins></i>

            1. <source id="m73mq"><ins id="m73mq"></ins></source>
            2. <td id="m73mq"><ins id="m73mq"><label id="m73mq"></label></ins></td>
            3. 男人添女人下面视频_久久精品欧美日韩_欧美日韩精品一二三区_亚洲一区二区三区激情_来一水AV@lysav

              產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

              干血斑DNA快速提取試劑盒

              簡(jiǎn)要描述:

              干血斑DNA快速提取試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控,含EGFP基因的CHO細(xì)胞 ENY2蛋白封閉多肽 莢膜組織胞漿菌PCR檢測(cè)試劑盒 大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA檢測(cè)試劑盒 轉(zhuǎn)氫1活性比色法檢測(cè)試劑盒 擬鹿角靈芝 22號(hào)染色體開放閱讀框23抗體

              更新時(shí)間:2024-01-15

              分享到: 1
              在線留言
              干血斑DNA快速提取試劑盒

              公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

              貨號(hào)

              產(chǎn)品名稱

              規(guī)格

              A-Tq3087

              干血斑DNA快速提取試劑盒

              50T

              A-Tq3087

              干血斑DNA快速提取試劑盒

              100T

              QQ截圖20240110094643.jpg



              65.jpg


              PCR基本步驟及注意事項(xiàng)?

              一、實(shí)驗(yàn)原理

              PCR是體外人工選擇性擴(kuò)增DNA的一種方法,它類似于生物體內(nèi)DNA的復(fù)制。在生物體內(nèi)DNA復(fù)制需要模板、引物、DNA聚合酶、DNA解旋酶、 dNTPs;而體外PCR反應(yīng)同樣需要類似的成分,有模板、引物、PCR Buffer、Taq酶、dNTPs。其中引物是人工設(shè)計(jì)的特定序列,實(shí)現(xiàn)對(duì)特定位置的擴(kuò)增;PCR Buffer提供一個(gè)反應(yīng)的緩沖環(huán)境;反應(yīng)過程同生物體內(nèi)一樣,DNA雙鏈打開,引物結(jié)合模板,延伸形成新鏈。而這些過程在生物體內(nèi)靠DNA解旋酶解鏈,而在體外在通過控制反應(yīng)溫度實(shí)現(xiàn)的。如常用94℃變性模板DNA打開雙鏈,在退火溫度處引物結(jié)合到模板上,最后在72℃完成延伸,并反復(fù)重復(fù)此過程即可實(shí)現(xiàn)對(duì)特定片段DNA的大量擴(kuò)增。到第三循環(huán)開始才產(chǎn)生出和靶DNA區(qū)段相同的DNA分子,進(jìn)一步循環(huán)地產(chǎn)生出靶DNA區(qū)段的指數(shù)加倍。

              在擴(kuò)增后期,由于產(chǎn)物積累,使原來呈指數(shù)擴(kuò)增的反應(yīng)變成平坦的曲線,產(chǎn)物不再隨循環(huán)數(shù)而明顯上升,這稱為平臺(tái)效應(yīng)。平臺(tái)期(Plateau)會(huì)使原先由于錯(cuò)配而產(chǎn)生的低濃度非特異性產(chǎn)物繼續(xù)大量擴(kuò)增,達(dá)到較高水平。因此,應(yīng)適當(dāng)調(diào)節(jié)循環(huán)次數(shù),在平臺(tái)期前結(jié)束反應(yīng), 減少非特異性產(chǎn)物。到達(dá)平臺(tái)期(Plateau)所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。

              二、主要的成分

              1.模板可以是多種形式,主要包括基因組DNA、質(zhì)粒DNA、攜帶病毒的基因組DNA、PCR產(chǎn)物,cDNA等,但不能為RNA。對(duì)于不同類型的模板,其主要不同在于預(yù)變性的時(shí)間以及模板的量。一般對(duì)于大的基因組DNA預(yù)變性時(shí)間10min足夠,質(zhì)粒DNA2min、攜帶病毒的基因組DNA預(yù)變性2min、PCR產(chǎn)物預(yù)變性2min即可。

              注意cDNA為單鏈DNA,但仍可做PCR的模板,只不過在第一輪循環(huán)時(shí)只有一個(gè)引物結(jié)合,合成另一條鏈。從第二輪開始,兩個(gè)引物均與特異位點(diǎn)結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)了與常規(guī)PCR的接軌。而同作為單鏈的RNA卻不能進(jìn)行PCR擴(kuò)增,原因就在于實(shí)現(xiàn)PCR反應(yīng)的是DNA聚合酶,只能特意識(shí)別DNA鏈。

              2.對(duì)于模版的量來說,一般25ul體系DNA的質(zhì)量為50—100ng。對(duì)于基因組DNA由于其結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,提取的濃度也往往比較大,為防止?jié)舛冗^大對(duì)PCR造成影響,故需對(duì)提取的DNA進(jìn)行梯度稀釋。否則濃度過高則可能會(huì)引起非特異性擴(kuò)增。對(duì)于質(zhì)粒及PCR產(chǎn)物由于其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,且提取濃度一般較低,則無需稀釋。

              67.jpgPCR實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意的問題有哪些?


              沒有ct值

              檢測(cè)結(jié)果遇到?jīng)]有Ct值情況,排查是否有以下問題:

              1、循環(huán)數(shù)不夠(一般不超過45循環(huán),不僅背景值提高,定量也不準(zhǔn));

              2、PCR程序設(shè)置錯(cuò)誤,檢測(cè)熒光信號(hào)的步驟有誤。一般SG法采用72℃延伸時(shí)采集,TaqMan法則一般在退火結(jié)束時(shí)或延伸時(shí)采集信號(hào),另外熒光采集是否選中;

              3、引物或探針降解。可通過PAGE電泳檢測(cè)引物和探針是否降解;

              4、模板量可能降解或上樣量不足(不超過500ng,根據(jù)試劑盒說明書即可), 對(duì)未知濃度的樣本應(yīng)從系列稀釋樣本的最高濃度做起;如果發(fā)生模板降解,應(yīng)考慮樣本準(zhǔn)備中雜質(zhì)的引入及反復(fù)凍融的情況,建議將模板樣本小量分裝儲(chǔ)備,避免反復(fù)凍融;

              5、引物探針是否合適(尤其是引物跨越內(nèi)含子,以確保擴(kuò)增基因組DNA;上下游引物Tm值超過4℃以上也會(huì)影響擴(kuò)增)。

              ct值過晚

              在相對(duì)定量中, Ct值一般控制在15—25之間比較好,如果在絕對(duì)定量中, 對(duì)低拷貝數(shù)的樣品,Ct值會(huì)增大, 但是一般不宜超過40循環(huán), 否則定量不準(zhǔn)確。

              因此,判斷Ct值出現(xiàn)過晚是否屬于非正常情況, 需要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和目的進(jìn)行。

              1、擴(kuò)增效率低。引物之間或者引物和探針的比例不合適, 需要進(jìn)行優(yōu)化;引物或探針設(shè)計(jì)不合理, 需要重新設(shè)計(jì);

              2、PCR程序不合適, 改用三步法進(jìn)行反應(yīng), 或者優(yōu)化退火/延伸溫度, 可以適當(dāng)降低退火溫度; 退火/延伸時(shí)間短(可以在推薦的時(shí)間條件下延長(zhǎng)10s);

              3、MgCl2濃度不合適,增加鎂離子濃度等。PCR各種反應(yīng)成分的降解或加樣量的不足;

              4、PCR產(chǎn)物太長(zhǎng)。PCR產(chǎn)物設(shè)計(jì)超過500bp;

              5、模板中存在抑制物。用高純度模板進(jìn)行PCR檢測(cè)或?qū)⒛0暹M(jìn)行稀釋。

              公司正在出售的產(chǎn)品:

              奧斯特奧斯特線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒

              EB病毒IgGELISA試劑盒 EBv IgG免費(fèi)代測(cè)試劑

              真菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

              壞死梭桿菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷

              二磷甘油變位ELISA試劑盒 BPGM免費(fèi)代測(cè)試劑

              耐青肺炎鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書

              馬巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

              二氫葉還原ELISA試劑盒

              雷氏普羅威登斯菌PCR檢測(cè)試劑盒

              腮腺炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒

              二羰基/L-糖還原ELISA試劑盒

              藍(lán)氏賈第鞭毛蟲A型染料法熒光定量PCR試劑盒

              尼帕病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

              防御β128ELISA試劑盒

              副溶血弧菌ToxR基因PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

              脲原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒

              肺炎衣原體抗體IgAELISA試劑盒

              口蹄疫O/A/Asia1(FMDV-O/-A/-Asia1)核檢測(cè)試劑盒

              鳥類髓細(xì)胞瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒

              封閉蛋白11ELISA試劑盒

              人參源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

              尼氏單孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

              復(fù)合2ELISA試劑盒

              菊花染料法PCR鑒定試劑盒

              擬態(tài)弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒

              鈣黏蛋白22ELISA試劑盒

              曲霉核檢測(cè)試劑盒

              牛巴氏桿菌(PB)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR)

              肝膠原凝集1ELISA試劑盒

              勞森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

              馬腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷

              γ分泌激活蛋白(PION)檢測(cè)試劑盒elisa

              Dectin-基因PCR檢測(cè)試劑盒

              貓種特異性基因PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

              人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)試劑盒ELISA

              益母草染料法PCR鑒定試劑盒

              款冬花染料法PCR鑒定試劑盒

              干血斑DNA快速提取試劑盒Q熱科克斯體1(Q fever)抗體(IgG)ELISA試劑盒

              頭狀葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒

              四輻射鳥圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒

              人苯丙氨(LPA) 試劑盒 ELISA

              松鼠猴皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

              豬鏈球菌溶血(SLY)毒基因PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

              人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒

              人多瘤病毒6探針法熒光定量PCR試劑盒

               


              男人添女人下面视频_久久精品欧美日韩_欧美日韩精品一二三区_亚洲一区二区三区激情_来一水AV@lysav
            4. <source id="m73mq"></source>

              1. <small id="m73mq"><tbody id="m73mq"><noframes id="m73mq"></noframes></tbody></small>
                1. 
                  
                  <form id="m73mq"><tr id="m73mq"></tr></form>
                  <source id="m73mq"></source>

                  <small id="m73mq"><tbody id="m73mq"><noframes id="m73mq"></noframes></tbody></small>

                      <i id="m73mq"><ins id="m73mq"></ins></i>

                      1. <source id="m73mq"><ins id="m73mq"></ins></source>
                      2. <td id="m73mq"><ins id="m73mq"><label id="m73mq"></label></ins></td>
                      3. 绵竹市| 洛浦县| 晴隆县| 射洪县| 宁安市| 正安县| 大港区| 玉林市| 龙口市| 甘德县| 沁阳市| 阜新市| 博罗县| 彝良县| 湘潭市| 香格里拉县| 绩溪县| 安康市| 余庆县| 湛江市| 临桂县| 罗山县| 宾川县| 浮梁县| 莱西市| 伊吾县| 闽清县| 崇阳县| 西畴县| 察隅县| 连江县| 山丹县| 怀柔区| 稷山县| 兰溪市| 昔阳县| 茂名市| 汽车| 乡城县| 那坡县| 西平县|