• <source id="m73mq"></source>

    1. <small id="m73mq"><tbody id="m73mq"><noframes id="m73mq"></noframes></tbody></small>
      1. 
        
        <form id="m73mq"><tr id="m73mq"></tr></form>
        <source id="m73mq"></source>

        <small id="m73mq"><tbody id="m73mq"><noframes id="m73mq"></noframes></tbody></small>

            <i id="m73mq"><ins id="m73mq"></ins></i>

            1. <source id="m73mq"><ins id="m73mq"></ins></source>
            2. <td id="m73mq"><ins id="m73mq"><label id="m73mq"></label></ins></td>
            3. 男人添女人下面视频_久久精品欧美日韩_欧美日韩精品一二三区_亚洲一区二区三区激情_来一水AV@lysav

              產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

              首頁>產(chǎn)品中心>PCR相關試劑>提取試劑盒>染料法熒光定量PCR試劑盒(化學修飾)

              染料法熒光定量PCR試劑盒(化學修飾)

              簡要描述:

              染料法熒光定量PCR試劑盒(化學修飾)公司正在出售的產(chǎn)品:人口腔癌細胞 重組人TNMD蛋白 超廣譜內(nèi)酰胺肺炎克雷伯菌PCR檢測試劑盒 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)試劑盒 ELISA 細胞色b5含量活性比色法檢測試劑盒 葡萄座腔菌 轉(zhuǎn)化生長因子β1結合蛋白1抗體

              更新時間:2024-01-15

              分享到: 1
              在線留言
              染料法熒光定量PCR試劑盒(化學修飾)

              商品屬性:

              產(chǎn)品名稱

              規(guī)格

              貨號

              染料法熒光定量PCR試劑盒(化學修飾)

              100反應

              A-Tq3010

              染料法熒光定量PCR試劑盒(化學修飾)

              200反應

              A-Tq3010

              染料法熒光定量PCR試劑盒(化學修飾)

              500反應

              A-Tq3010

              QQ截圖20240110094643.jpg


              65.jpg

              67.jpg


              PCR基本步驟及注意事項?

              一、實驗原理

              PCR是體外人工選擇性擴增DNA的一種方法,它類似于生物體內(nèi)DNA的復制。在生物體內(nèi)DNA復制需要模板、引物、DNA聚合酶、DNA解旋酶、 dNTPs;而體外PCR反應同樣需要類似的成分,有模板、引物、PCR Buffer、Taq酶、dNTPs。其中引物是人工設計的特定序列,實現(xiàn)對特定位置的擴增;PCR Buffer提供一個反應的緩沖環(huán)境;反應過程同生物體內(nèi)一樣,DNA雙鏈打開,引物結合模板,延伸形成新鏈。而這些過程在生物體內(nèi)靠DNA解旋酶解鏈,而在體外在通過控制反應溫度實現(xiàn)的。如常用94℃變性模板DNA打開雙鏈,在退火溫度處引物結合到模板上,最后在72℃完成延伸,并反復重復此過程即可實現(xiàn)對特定片段DNA的大量擴增。到第三循環(huán)開始才產(chǎn)生出和靶DNA區(qū)段相同的DNA分子,進一步循環(huán)地產(chǎn)生出靶DNA區(qū)段的指數(shù)加倍。

              在擴增后期,由于產(chǎn)物積累,使原來呈指數(shù)擴增的反應變成平坦的曲線,產(chǎn)物不再隨循環(huán)數(shù)而明顯上升,這稱為平臺效應。平臺期(Plateau)會使原先由于錯配而產(chǎn)生的低濃度非特異性產(chǎn)物繼續(xù)大量擴增,達到較高水平。因此,應適當調(diào)節(jié)循環(huán)次數(shù),在平臺期前結束反應, 減少非特異性產(chǎn)物。到達平臺期(Plateau)所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。

              二、主要的成分

              1.模板可以是多種形式,主要包括基因組DNA、質(zhì)粒DNA、攜帶病毒的基因組DNA、PCR產(chǎn)物,cDNA等,但不能為RNA。對于不同類型的模板,其主要不同在于預變性的時間以及模板的量。一般對于大的基因組DNA預變性時間10min足夠,質(zhì)粒DNA2min、攜帶病毒的基因組DNA預變性2min、PCR產(chǎn)物預變性2min即可。

              注意cDNA為單鏈DNA,但仍可做PCR的模板,只不過在第一輪循環(huán)時只有一個引物結合,合成另一條鏈。從第二輪開始,兩個引物均與特異位點結合,從而實現(xiàn)了與常規(guī)PCR的接軌。而同作為單鏈的RNA卻不能進行PCR擴增,原因就在于實現(xiàn)PCR反應的是DNA聚合酶,只能特意識別DNA鏈。

              2.對于模版的量來說,一般25ul體系DNA的質(zhì)量為50—100ng。對于基因組DNA由于其結構比較復雜,提取的濃度也往往比較大,為防止?jié)舛冗^大對PCR造成影響,故需對提取的DNA進行梯度稀釋。否則濃度過高則可能會引起非特異性擴增。對于質(zhì)粒及PCR產(chǎn)物由于其結構簡單,且提取濃度一般較低,則無需稀釋。

              PCR實驗中應該注意的問題有哪些?

              沒有ct值

              檢測結果遇到?jīng)]有Ct值情況,排查是否有以下問題:

              1、循環(huán)數(shù)不夠(一般不超過45循環(huán),不僅背景值提高,定量也不準);

              2、PCR程序設置錯誤,檢測熒光信號的步驟有誤。一般SG法采用72℃延伸時采集,TaqMan法則一般在退火結束時或延伸時采集信號,另外熒光采集是否選中;

              3、引物或探針降解。可通過PAGE電泳檢測引物和探針是否降解;

              4、模板量可能降解或上樣量不足(不超過500ng,根據(jù)試劑盒說明書即可), 對未知濃度的樣本應從系列稀釋樣本的最高濃度做起;如果發(fā)生模板降解,應考慮樣本準備中雜質(zhì)的引入及反復凍融的情況,建議將模板樣本小量分裝儲備,避免反復凍融;

              5、引物探針是否合適(尤其是引物跨越內(nèi)含子,以確保擴增基因組DNA;上下游引物Tm值超過4℃以上也會影響擴增)。

              ct值過晚

              在相對定量中, Ct值一般控制在15—25之間比較好,如果在絕對定量中, 對低拷貝數(shù)的樣品,Ct值會增大, 但是一般不宜超過40循環(huán), 否則定量不準確。

              因此,判斷Ct值出現(xiàn)過晚是否屬于非正常情況, 需要根據(jù)具體實驗設計和目的進行。

              1、擴增效率低。引物之間或者引物和探針的比例不合適, 需要進行優(yōu)化;引物或探針設計不合理, 需要重新設計;

              2、PCR程序不合適, 改用三步法進行反應, 或者優(yōu)化退火/延伸溫度, 可以適當降低退火溫度; 退火/延伸時間短(可以在推薦的時間條件下延長10s);

              3、MgCl2濃度不合適,增加鎂離子濃度等。PCR各種反應成分的降解或加樣量的不足;

              4、PCR產(chǎn)物太長。PCR產(chǎn)物設計超過500bp;

              5、模板中存在抑制物。用高純度模板進行PCR檢測或?qū)⒛0暹M行稀釋。

              公司正在出售的產(chǎn)品:

              麻疹病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

              SAALDL復合物ELISA試劑盒 SAALDL免費代測試劑

              人腺病毒D37型探針法熒光定量PCR試劑盒

              附紅細胞體屬通用PCR檢測試劑盒價格

              動力蛋白軸絲重鏈11ELISA試劑盒 DNAH11免費代測試劑

              悉尼馬爾太蟲PCR檢測試劑盒說明書

              豬瘟病毒/豬藍耳病病毒通用型/口蹄疫病毒通用型(CSFV/PRRSV-U/FMDV-U)核檢測試劑盒

              防御β121ELISA試劑盒

              流行性乙型腦炎病毒PCR檢測試劑盒

              偏肺病毒PCR檢測試劑盒

              對稱二甲基精氨ELISA試劑盒

              鹿源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒

              棉花源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

              二氫嘧啶樣2ELISA試劑盒

              皮炎外瓶霉探針法熒光定量PCR試劑盒

              牛皰疹病毒3型染料法熒光定量PCR試劑盒(暫停)

              泛蛋白DELISA試劑盒

              登革熱病毒3(DFV-III)核檢測試劑盒

              牛皮蠅蛆PCR檢測試劑盒

              防御β113ELISA試劑盒

              輕型鏈球菌染料法熒光定量PCR試劑盒

              摩氏摩根菌PCR檢測試劑盒

              非紅細胞血影蛋白β4ELISA試劑盒

              空腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

              滅鮭氣單胞菌PCR檢測試劑盒

              分揀連接蛋白7ELISA試劑盒

              侵肺巴斯德菌PCR檢測試劑盒價格

              牛皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒

              鈣蛋白6ELISA試劑盒

              流感病毒H14亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

              綠膿假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

              人別孕烯醇酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)ELISA檢測試劑盒

              禽嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

              木絲霉PCR檢測試劑盒供應

              人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)試劑盒elisa

              乙型肝炎病毒通用型染料法熒光定量PCR試劑盒

              超廣譜β-內(nèi)酰胺肺炎克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒

              β防御104(DEFB104A)ELISA試劑盒

              白蛉熱西西里病毒PCR檢測試劑盒

              內(nèi)羅畢羊病病毒PCR檢測試劑盒

              人白介1受體相關激-4(IRAK-4)ELISA試劑盒

              染料法熒光定量PCR試劑盒(化學修飾)呼吸道合胞病毒BPCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

              甲型流感病毒H3亞型(IAV-H3)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR)

              人蛋白磷(PP)試劑盒 ELISA

              犬艾利希體(犬埃立克體)探針法熒光定量PCR試劑盒

               


              男人添女人下面视频_久久精品欧美日韩_欧美日韩精品一二三区_亚洲一区二区三区激情_来一水AV@lysav
            4. <source id="m73mq"></source>

              1. <small id="m73mq"><tbody id="m73mq"><noframes id="m73mq"></noframes></tbody></small>
                1. 
                  
                  <form id="m73mq"><tr id="m73mq"></tr></form>
                  <source id="m73mq"></source>

                  <small id="m73mq"><tbody id="m73mq"><noframes id="m73mq"></noframes></tbody></small>

                      <i id="m73mq"><ins id="m73mq"></ins></i>

                      1. <source id="m73mq"><ins id="m73mq"></ins></source>
                      2. <td id="m73mq"><ins id="m73mq"><label id="m73mq"></label></ins></td>
                      3. 双鸭山市| 监利县| 伊春市| 吉安市| 泾川县| 和林格尔县| 佳木斯市| 岳池县| 南木林县| 达拉特旗| 洪湖市| 繁昌县| 岑巩县| 安多县| 宣城市| 丹凤县| 太湖县| 崇左市| 酒泉市| 金昌市| 安龙县| 咸阳市| 商丘市| 东丰县| 浦北县| 铜山县| 兴文县| 周至县| 莎车县| 长岛县| 那坡县| 姚安县| 揭东县| 富平县| 福建省| 探索| 阜新市| 金沙县| 甘肃省| 吉木萨尔县| 海晏县|