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              產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

              無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶

              簡要描述:

              無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶公司正在出售的產(chǎn)品:人骨骼肌成肌細(xì)胞-永生化 KIAA1712蛋白封閉多肽 雞皮刺螨PCR檢測試劑盒 大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)試劑盒 ELISA 土壤硅鋁率活性比色法檢測試劑盒 墻壁威廉姆斯氏菌 原鈣粘蛋白γA4抗體

              更新時間:2024-01-14

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              無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶

              公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

              描述:Benzonase 核酸酶是 經(jīng)基因工程改進的核酸內(nèi)切酶。它能降解所有形式(包括單鏈,雙鏈,
              線性和環(huán)狀)的 DNA 和 RNA 而沒有蛋白裂解活性,在廣泛條件范圍具有很高的特異性。它將核酸消化成 3-5 堿基長度
              (雜交限度以下)的 5’-單磷酸寡核苷酸,從重級蛋白中去除核酸的操作,符合 FDA 關(guān)于核酸污染的處理規(guī)程。
              Benzonase 核酸酶迅速水解核酸的能力使該酶成為降低粘度以減少處理時間和增加蛋白產(chǎn)量的選擇。
                生產(chǎn)的無內(nèi)毒素級的 Benzonase 核酸酶,內(nèi)毒素含量<40EU/mL(按照單位換算量計算為,每 1000U 中含有
              的內(nèi)毒素<0.15EU),其指標(biāo)符合 FDA 的標(biāo)準(zhǔn)。
              單位定義:在 30 分鐘內(nèi)使△ A260 值降低 1.0(相當(dāng)于消化 37 μg DNA )的酶量定義為一個活性單位。
              注意:含大量蛋白、細(xì)胞壁、其它鹽分的粗制品,對該酶有部分抑制作用,使用時需要增加酶的用量。
              應(yīng)用
              蛋白提取時去除核酸污染
              2D 凝膠電泳
              Western Blot
              生物制藥
              疫苗生產(chǎn)
              儲存:置于-20°C 保存。

              貨號

              產(chǎn)品名稱

              規(guī)格

              A-PJ1131

              無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶

              25KU

              A-PJ1131

              無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶

              100KU

              A-PJ1131

              無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶

              5000ku

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              PCR 反應(yīng)需要使用哪些試劑和設(shè)備?

              試劑:
              模板DNA:PCR反應(yīng)需要模板DNA,如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等;引物:PCR反應(yīng)的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;dNTPs:PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細(xì)胞分裂、DNA合成等生物學(xué)過程,用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增;Taq DNA聚合酶:PCR反應(yīng)需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴增DNA鏈;PCR buffer溶液:對PCR反應(yīng)具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應(yīng)pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛,可增強PCR反應(yīng)特異性,從而提高反應(yīng)效率;酶切體系:PCR擴增往往涉及到重組、構(gòu)建和測序等等實驗步驟,常常需要進行酶切操作。MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn),用來判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物;
              設(shè)備:
              PCR儀:用于控制反應(yīng)溫度,保證PCR反應(yīng)時不同溫度環(huán)節(jié)的嚴(yán)格控制;電泳槽:用于分離PCR擴增產(chǎn)物;核酸提取儀:從組織樣本中全自動提取核酸。  這些試劑和設(shè)備在PCR分子生物學(xué)技術(shù)中均是,只有在有序齊全的基礎(chǔ)上,才能進行PCR反應(yīng)并得出準(zhǔn)確結(jié)果。

              PCR相關(guān)基礎(chǔ)實驗:

              PCR反應(yīng)基本步驟一般的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)由20到35個循環(huán)組成,每個循環(huán)包括以下3個步驟:

              一、變性:

              利用高溫(93-98℃)使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個循環(huán)之前,通常加熱長一些時間以確保模板和引物分離,僅以單鏈形式存在。該步驟時間1-2分鐘,接下來PCR儀就控制溫度進入循環(huán)階段。

              二、退火或稱接合,復(fù)性:

              在DNA雙鏈分離后,降低溫度使得引物可以結(jié)合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點5℃。錯誤的退火溫度可能導(dǎo)致引物不與模板結(jié)合或者錯誤地結(jié)合。該步驟時間1-2分鐘。

              三、延伸:

              DNA聚合酶由降溫時結(jié)合上的引物開始沿著DNA鏈合成互補鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長度。傳統(tǒng)的Taq估計合成1000bp/min、較新的Tbr(來自于嗜熱菌Thermus brockianus)約40秒、商業(yè)公司生產(chǎn)的融合型聚合酶僅需約10-15秒。

              5.pngPCR反應(yīng)條件優(yōu)化:

              1、變性溫度和時間:

              保證模板DNA解鏈?zhǔn)潜WC整個PCR擴增成功的關(guān)鍵。加熱90~95°C, 30~60s,再復(fù)雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過高或高溫持續(xù)時間過長,可對Taq酶活性和dNTP分子造成損害。

              2、復(fù)性溫度和時間:

              PCR擴增特異性取決于復(fù)性過程中引物與模板的結(jié)合。復(fù)性溫度越高,產(chǎn)物特異性越高。復(fù)性溫度越低,產(chǎn)物特異性越低。需根據(jù)引物的Tm值具體設(shè)定。

              3、延伸溫度和時間:

              一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個核苷酸時,過高的延伸溫度不利于引物與模板的結(jié)合,可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應(yīng)時間,可根據(jù)待擴增片段的長度而定,小于1kb, 1min足夠;大于1kb需加長延伸時間。Taq酶可根據(jù)1kb/min增加時間。這里需要注意,延伸時間過長可能出現(xiàn)非特異擴增。因此需要設(shè)置恰到好處的延伸時間。

              4、循環(huán)數(shù):

              其他參數(shù)選定后,PCR循環(huán)次數(shù)主要取決于模板DNA的濃度。理論上說20?25次循環(huán)后,PCR產(chǎn)物的積累即可達到最大值,實際操作中由于每步反應(yīng)的產(chǎn)率不可能達到100%,因此不管模板濃度是多少,20~30次是比較合理的循環(huán)次數(shù)。循環(huán)次數(shù)越多,非特異擴增增加。

              公司正在出售的產(chǎn)品:


              人免疫缺陷病毒1MB型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

              β1,4-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移2ELISA試劑盒 B4GALNT2免費代測試劑

              人腺病毒D86型探針法熒光定量PCR試劑盒

              鴨瘟病毒PCR檢測試劑盒說明書

              蛋白水解誘導(dǎo)因子/皮離蛋白ELISA試劑盒 PIF/DCD免費代測試劑

              腦膜炎奈瑟菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)

              馬源性成分(Horse)核檢測試劑盒

              細(xì)胞附著蛋白相互作用蛋白ELISA試劑盒

              馬肺炎病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

              鹿特定基因序列PCR檢測試劑盒

              地松誘導(dǎo)蛋白ELISA試劑盒

              馬疽桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

              梅毒螺旋體梅毒亞種染料法熒光定量PCR試劑盒

              多聚ADP核糖聚合ELISA試劑盒

              雞附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒

              帕臘南病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

              耳蝶呤1ELISA試劑盒

              艱難梭菌(TCD-A)核檢測試劑盒

              帕臘南病毒PCR檢測試劑盒

              二酰甘油-O-酰基轉(zhuǎn)移同源物2ELISA試劑盒

              禽類肉瘤病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

              梅迪一維斯納病毒PCR檢測試劑盒

              泛激1ELISA試劑盒

              闊盤吸蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒

              毛細(xì)線蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒

              防御β126ELISA試劑盒

              皮里陶病毒PCR檢測試劑盒直銷

              瘧原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

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              呂氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

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              人促甲狀腺受體(TSHR)抗體檢測試劑盒elisa

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              人可溶性P選擇(sP-selectin)試劑盒ELISA

              副溶血嗜血桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒

              牛附紅細(xì)胞體(牛嗜血支原體)探針法熒光定量PCR試劑盒

              無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶人白介25(IL-25)ELISA試劑盒

              薩比亞病毒PCR檢測試劑盒

              無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

              γ谷氨酰轉(zhuǎn)移(GGT) ELISA Kit

              遲鈍愛德華菌探針法熒光定量PCR試劑盒

              轉(zhuǎn)基因大豆EPSPS基因核檢測試劑盒

              人單純皰疹病毒型抗體(HSVⅡ-Ab)試劑盒 ELISA

              通用/H5亞型(AIV-U/AIV-H5)核檢測試劑盒

               


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