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              產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

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              衣原體通用型(CP)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

              簡要描述:

              衣原體通用型(CP)檢測試劑盒(熒光-PCR法)的相關產(chǎn)品:phospho-ERK1(Thr202/Tyr204) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml
              A1BG α1B糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
              BNIP3L 促凋亡BNIP3L蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
              phospho-SYN1(Ser549) 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml

              更新時間:2022-02-25

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              衣原體通用型(CP)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

              PCR實驗方法步驟:

              方法

              1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

              10×PCR buffer

              5 μl     dNTP mix (2mM)

              4 μl     引物1(10pM)

              2 μl     引物2(10pM)

              2 μl     Taq酶 (2U/μl)

              1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)

              1 μl      加ddH2O至 50 μl

              產(chǎn)品特點:

              ◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;

              ◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;

              ◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;

              ◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

              操作流程:

              收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質粒抽提——>質粒測序——>測序結果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質粒實物保存。

              特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

              產(chǎn)品名稱

              規(guī)格

              貨號

              衣原體通用型(CP)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

              50T

              FS-01H4463

               


              操作流程.jpg

               

              實時熒光定量PCR:

              實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:

              1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。

              2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。

              外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

              定量PCR方法:

              a、競爭法

              選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。

              b、內參照法

              在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測

              使用方法:

              一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。

              1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。

              2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。

              3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

              4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

              5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

              6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。

              二、樣品 DNA 的制備

              7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

              8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

              三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)

              9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。

              鹿角 規(guī)格: 0.5g

              四環(huán) 規(guī)格: 200mg

              白茅根對照藥材 規(guī)格: 1g

              107-43-7甜菜;甘氨三內鹽 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

              51014-29-0異去氫鉤藤 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

              太子參環(huán)肽B 規(guī)格: 20mg

              丁公藤 規(guī)格: 1g

              472-11-7魯斯可皂元 規(guī)格: 20mg

              15291-75-5銀杏內酯A 規(guī)格: 20mg

              1;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.25g

              衣原體通用型(CP)檢測試劑盒(熒光-PCR法)細胞脂質過氧化物異構前列腺素(ISOPROSTANE)比色法測定試劑盒  20次

              細胞脂質過氧化物異構前列腺素(ISOPROSTANE)細胞流式分析試劑盒  10次

              冰凍切脂質過氧化物異構前列腺素(ISOPROSTANE)熒光染色試劑盒  10次

              石蠟切脂質過氧化物異構前列腺素(ISOPROSTANE)熒光染色試劑盒  10次

              脂質過氧化物異構前列腺素(ISOPROSTANE)ELISA定量測定試劑盒  48/96次

              脂質過氧化物異構前列腺素(ISOPROSTANE)高效液相色譜 (HPLC)分析試劑盒  20次

              細胞脂質過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaric acid)比色法測定試劑盒  20次

              細胞脂質過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaric acid)細胞流式分析試劑盒  10次

              冰凍切脂質過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaric acid)熒光染色試劑盒  10次

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